이중 특이성 부여를 통한 올리고뉴클레오타이드 혼성화 특이성 개선(DPO) 기술
| 작성자 | 관리자 | ||
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| 작성일 | 2010-07-23 | 조회수 | 9,298 |
| 업체명 | (주)씨젠 | ||
| 인증기간 | 2009-04-15 ~ 2012-04-14 | ||
| 첨부파일 | |||
2_(주)씨젠_기술요약.pdf(1B)
회사명 : (주)씨젠
회사소개 :
2000년 9월에 설립된 (주)씨젠은 분자진단기술 개발 및 제품제조 전문기업으로 설립 초기부터 유전자증폭 원천기술 개발을 위해 장기적인 투자 전략을 수립하여 추진하고 있습니다. 그 성과로 한 번에 다수병원체 검사가 가능한 동시다중 유전자증폭 (Multiplex PCR) 기술인 ACP™와 DPO™ Technology, READ™ Technology 등 우수한 유전자 진단기술을 보유할 수 있게 되었고, 또한 오랜 기간 축적된 전문기술과 노하우를 바탕으로 신종플루, 일반감기 등 호흡기질환, 뇌수막염, 성감염증, 결핵, 패혈증, 설사, 자궁경부암 원인바이러스 검사 등 수십 종에 이르는 유전자진단 제품을 출시하고 있습니다. 이 제품들은 현재 국내 50개 대학병원과 임상검사센터에 공급되고 있으며 해외 50여 개국 300개 이상의 기관에 수출되고 있습니다.
NET인증기술소개 : 이중 특이성 부여를 통한 올리고뉴클레오타이드 혼성화 특이성 개선(DPO) 기술
기존 PCR의 한계인 비특이적 template 결합을 근본적으로 억제하는 새로운 primer 기술!
DPO™특징
1. 프라이머 다지인할 수 있는 부위가 자유롭고 PCR 최적화 조건이 용이함
2. 뛰어난 고도의 특이성
3. 확실한 재현성
4. Multiplex-PCR 수행시 primer간의 dimer 형성 또는 competition이 없음
5. 단일 염기 변이 구별
6. 다양한 적용 범위
DPO™구조
Dual Priming Oligonucleotide (DPO™)는 polydeoxyinosine linker (poly (I) linker)의 삽입으로 인해 두 개의 priming 부위 (5'-end Stabilizer와 3'-end Determiner)를 가짐으로써 기존의 primer와 구조적, 기능적으로 차별화된다. poly (I) linker는 자체적으로 priming에 관여하지는 않으나 DPO™를 5'-end Stabilizer와 3'-end Determiner 부위로 각각 구분화하여 "bubble like structure"를 형성합니다.
DPO™원리
poly (I) linker에 의해 2 개의 priming 부위를 갖는 DPO™는 다음과 같은 dual priming 과정을 통하여 target 유전자만을 특이적으로 증폭시킵니다.
Step 1: Poly(I) linker activation
Deoxyinosine은 natural base보다 상대적으로 낮은 Tm 값 (Tm < 2 ℃)을 가짐으로써 약한 수소결합으로 인해 특정 온도에서 " bubble-like structure"를 형성하여 이로 인해 DPO™의 5'-end
와 3'-end 부분을 각각 "Stabilizer"와 "Determiner"로 구분 지어 줍니다.
Step 2: First priming reaction
우선 DPO™의 긴 염기 서열의 5'-end가 "Stabilizer"로써 먼저 template의 target sequence에 안정적으로 annealing을 시작합니다.
Step 3: Second priming reaction
DPO™의 짧은 염기 서열의 3'-end가 "Determiner"로써 template의 나머지 target sequence
부위에 annealing을 하면 이후 extention 단계로 진행됩니다.
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